کاربرد تریپسین (Trypsin) آزمایشگاه

در ادامه برات یه مطلب کامل، دقیق و مناسب برای وب‌سایت فروش مواد شیمیایی آماده کردم در مورد تریپسین (Trypsin) و کاربردش در آزمایشگاه، مخصوصاً در زمینه کشت سلولی.

✅ تریپسین (Trypsin) در آزمایشگاه | نقش، کاربرد و نکات ایمنی

تریپسین یکی از آنزیم‌های بسیار پرکاربرد در زیست‌شناسی سلولی و مولکولی است که عمدتاً در فرآیند جداسازی سلول‌ها از سطح ظرف کشت استفاده می‌شود. این آنزیم از خانواده پروتئازهاست و با تجزیه پیوندهای پپتیدی بین آمینواسیدها، به شکستن پروتئین‌ها کمک می‌کند.

🔬 تریپسین چیست؟

تریپسین یک آنزیم پروتئولیتیک (پروتئین‌بر) است که به طور طبیعی در لوزالمعده تولید می‌شود و در محیط‌های آزمایشگاهی، معمولاً از لوزالمعده گاو یا خوک استخراج می‌گردد. این آنزیم معمولاً در کنار EDTA به‌صورت ترکیبی به نام Trypsin-EDTA استفاده می‌شود تا همزمان اتصال سلول‌ها به یکدیگر و به بستر ظرف کشت، به‌طور مؤثری قطع شود.

ترکیبات رایج تریپسین آماده مصرف

1. تریپسین 0.25% / EDTA 1 mM
2. تریپسین 0.05% / EDTA 0.02% (مناسب برای سلول‌های حساس‌تر)
3. ((کاربردهای تریپسین در آزمایشگاه))
4. جداسازی سلول‌ها از کف فلاسک یا پلیت‌های کشت سلولی
5. پاساژ دادن (Passaging) یا ساب‌کالچر کردن خطوط سلولی
6. آماده‌سازی نمونه برای شمارش سلولی یا فلوسایتومتری
7. تجزیه پروتئین‌ها در آنالیزهای پروتئومیکس یا SDS-PAGE
8. کار با بافت‌ها برای استخراج سلول‌های منفرد.
9. ((مزایای استفاده از تریپسین))
10. ساده و سریع برای جدا کردن سلول‌ها بدون نیاز به ابزار مکانیکی
11. مقرون‌به‌صرفه و موجود در اشکال مختلف (محلول، پودری، گریدهای مختلف)
12. سازگار با انواع سلول‌ها (در غلظت‌های مختلف)
13. ⚠️ نکات مهم در استفاده از تریپسین:
14. زمان انکوباسیون مهم است: قرارگیری طولانی‌مدت سلول‌ها در معرض تریپسین می‌تواند به غشای سلولی آسیب بزند. معمولاً ۲–۵ دقیقه در ۳۷ درجه سانتی‌گراد کافی است.
15. عمل تریپسین را متوقف کنید: بعد از جداسازی سلول‌ها، باید با محیط حاوی سرم (مانند DMEM + FBS) آنزیم را غیرفعال کرد، چون سرم حاوی مهارکننده‌های طبیعی تریپسین است.
16. استفاده از محیط بدون کلسیم و منیزیم: چون این یون‌ها اتصال سلول‌ها به یکدیگر را تقویت می‌کنند، بهتر است از PBS بدون Ca/Mg قبل از تریپسین استفاده شود.
17. نگهداری: محلول آماده تریپسین باید در دمای -20°C نگهداری شود و بعد از ذوب شدن، در 4°C تا ۲ هفته قابل استفاده است.
18. گریدهای تریپسین موجود در بازار
    نوع
    کاربرد
    GMP grade
    برای مصارف دارویی و بالینی
    Cell culture grade
    مناسب برای کارهای تحقیقاتی و کشت سلولی
    Proteomics grade
    مناسب برای تجزیه پروتئینی و آنالیز آنزیمی
19. شکل‌های موجود
20. محلول آماده به مصرف (Sterile filtered)
21. پودر لیوفیلیزه (برای حل کردن در PBS یا آب استریل)
22. محلول آماده به مصرف (Sterile filtered